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    类风湿关节炎,关节液中趋化因子的测定

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    类风湿关节炎,关节液中趋化因子的测定

    帖子  Admin 于 周一 五月 21, 2012 2:21 am


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    【关键词】 类风湿关节炎,关节液中趋化因子的测定

      据最新统计,类风湿关节炎( rheumatoid arthritis, RA)在全球的发病率为22~60/10万人口,在关节炎中它是致残率较高的疾病。虽然类风湿关节炎的发病机制目前仍不十分明确,但是许多研究表明细胞因子作用于多种细胞并且相互调节形成一个网络,在类风湿关节炎的滑膜病变中起着核心作用[1]。调节活化正常T细胞表达和分泌因子(regulated on activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)及SDF-1 (stromal cell-derived factor-1)均为炎症性趋化因子,具有调节T淋巴细胞分化的功能。作者对RA患者血清和病变膝关节滑液中RANTES和SDF-1水平进行检测,并与外伤截肢者对照,旨在探讨其在RA发病中的作用。

      1 资料与方法

      1.1 一般资料

      实验组血清及膝关节滑液取材于2002至2005年金华各医院风湿科初诊RA患者23例,均符合1987年美国风湿病协会修订的类风湿关节炎诊断标准。对照组血清及膝关节滑液均为本院因外伤截肢患者共16例。

      1.2 标本收集

      抽取空腹外周静脉血5ml,以2500r/min离心15min,取血清,置于-20℃备检。细针抽取关节滑液2ml,置于-80℃备检。

      1.3 检测方法

      RANTES及SDF-1的检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA),操作按照R&D试剂盒说明书进行。其主要步骤为:分别向包被鼠抗人RANTES单抗和SDF-1单抗的微孔内加入50μl的RANTES、SDF-1标准品或检测血清、按1:3稀释的关节滑液,将96孔板盖上薄膜置于室温中孵育2 h,孵育后洗涤3次。分别加入50μl酶联复合物,显色,全自动酶标仪分别读取RANTES及SDF-1浓度,标本均行复孔检测,均值为终浓度。

      1.4 统计学处理

      数据以(x±s)表示,两组间比较采用SPSS 11.0软件,作t检验。

      2 结果

      两组血清及滑液RANTES、SDF-1水平的比较见表1,RA组患者血清及关节滑液RNATES的水平显著高于对照组,且RA组内关节滑液中的含量较血清中明显升高,差异有显著性(P<0.05)。RA患者血清及关节滑液SDF-1的水平高于对照组,差异有显著性(P<0.01),但是RA组内关节滑液中的SDF-1含量与血清相比,差异无显著性。表1 两组血清及滑液RANTES、SDF-1的水平(略)注:同组内与血清水平比较P<0.01;与对照组比较#P<0.05

      3 讨论

      RA是以关节滑膜有慢性炎症和血管翳形成,软骨和软骨下骨破坏,最终造成关节软骨破坏并导致关节畸形和强直,为主要病理改变的自身免疫性疾病。而趋化因子是一组具有趋化作用的细胞因子,能吸引免疫细胞到免疫应答局部,参与免疫调节和免疫病理反应。有研究证实,RANTES 通过与细胞表面相应的CC 亚族趋化因子受体(CCR1、CCR3 和CCR5) 结合,特异吸引CD4+ / CDRO45+ T 细胞进入炎性部位,在RA的发生发展中起着极为重要的作用。RANTES介导炎症过程与其受体CCR5内皮细胞上的表达密切相关[2]。基质细胞衍生因子一1(SDF一1)是趋化因子CXC亚家族的重要成员之一,主要表达在慢性炎症组织如银屑病皮肤和风湿病滑膜,通过与其受体CXCR4的结合趋化内皮细胞而参与血管形成过程。在RA 患者的滑膜中,SDF-1可结合在内皮细胞表面的硫酸乙酰肝素分子上,促进血管形成和炎症细胞浸润,从而在RA中发挥多种功能[3]。如调节白细胞通过内皮细胞屏障进入炎症部位,造成组织损伤和疾病状态,与类风湿性关节炎的慢性多关节滑膜炎病变有关[4]。

      作者通过采用ELISA 方法检测RA患者血清及关节液的RANTES、SDF-1水平,并与外伤截肢者对照,结果发现RA患者血清和滑液中RANTES、SDF-1 水平均显著高于对照组(P<0.01),且RA 患者关节液RANTES 水平升高更为明显(P<0.01)。而RA患者血清SDF-1水平与滑液相比差异无显著性(P>0.05)。本实验中RA患者关节液RANTES 水平升高与血清相比更为明显,提示RA患者血清增高的RANTES主要来自于病变关节部位,这与以前的研究有相似之处。正常情况下,细胞因子的表达和分泌受机体严格的调控,在病理状态下,细胞因子会出现异常性表达,表现为细胞因子及其受体的缺陷,细胞因子表达过高,以及可溶性细胞因子受体的水平增加等。在本实验中发现类风湿关节炎患者的RANTES,SDF-1含量明显增高,而这些细胞因子均可促进大量炎症细胞如粒细胞,巨噬细胞的局部浸润和组织坏死,加重病情,这不仅为揭示某些趋化因子与RA发生发展的关系,而且,也为临床治疗RA提供了新的思路,即应用这些细胞因子的抑制剂有可能治疗这类炎症性细胞因子水平升高的疾病。但还需进一步深入研究。

      【参考文献】

      1 Szekanecz Z, Szucs G, Szanto S, et al. Chemokines in rheumatic diseases. Curr Drug Targets,2006,7(1):91~102.

      2 朱平,王彦宏,樊春杨.趋化因子受体CCR5及其配体在类风湿关节炎患者滑液及滑膜中的表达.中华医学杂志,2001,81(17):1038~1041.

      3 A Yoshie O. Chemokines :a new classification system and their role in immunity. Immunity, 2000, 12(2):121~127.

      4 黄向阳,朱平. CC 亚族趋化因子在类风湿关节炎的研究进展. 中华风湿病学杂志,2001,5(2):119~122.



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